凝膠滲透色譜(GelPermeationChromatography、GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不僅可用于小分子物質的分離和鑒定,而且可以用來分析化學性質相同分子體積不同的高分子同系物。
凝膠具有化學惰性,它不具有吸附、分配和離子交換作用。讓被測量的高聚物溶液通過一根內裝不同孔徑的色譜柱,柱中可供分子通行的路徑有粒子間的間隙(較大)和粒子內的通孔(較小)。當聚合物溶液流經(jīng)色譜柱(凝膠顆粒)時,較大的分子(體積大于凝膠孔隙)被排除在粒子的小孔之外,只能從粒子間的間隙通過,速率較快;而較小的分子可以進入粒子中的小孔,通過的速率要慢得多;中等體積的分子可以滲入較大的孔隙中,但受到較小孔隙的排阻,介乎上述兩種情況之間。[1]經(jīng)過一定長度的色譜柱,分子根據(jù)相對分子質量被分開,相對分子質量大的在前面(即淋洗時間短),相對分子質量小的在后面(即淋洗時間長)。自試樣進柱到被淋洗出來,所接受到的淋出液總體積稱為該試樣的淋出體積。當儀器和實驗條件確定后,溶質的淋出體積與其分子量有關,分子量愈大,其淋出體積愈小。
凝膠色譜不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質量和相對分子質量分布,同時根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離脂溶性和水溶性物質,分離相對分子質量的范圍從幾百萬到100以下。近年來,凝膠色譜也廣泛用于小分子化合物。相對分子質量相近而化學結構不同的物質,不可能通過凝膠滲透色譜法達到*分離純化的目的。凝膠色譜不能分辨分子大小相近的化合物,相對分子質量相差需在10%以上才能得到分離。